部分发酵产品配方和工艺

   日期:2019-07-11     来源:互联网    作者:admin    浏览:0    评论:0    
核心提示:| arJinggangensis),属好氧放线菌。井岗霉素的工业生产过程如下:筛选后的菌种经固体增殖培养后,接入种子罐,在40’C下,通气
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arJinggangensis),属好氧放线菌。井岗霉素的工业生产过程如下:筛选后的菌种经固体增殖培养后,接入种子罐,在40’C下,通气培养20h后,移入发酵罐,在40C.通气量0.5~0.8vvm条件下,发酵40h放罐,将发酵液过滤后,浓缩至所需浓度,成品包装。
井岗霉素1976年通过鉴定并开始工业生产,但由于种种原因对其发酵过程并未进行系统地研究。同时,发酵工艺也维持在传统的间歇发酵方法,因而井岗霉素发酵的水平(俗称效价)一直徘徊在一万单位(ug/mL)左右,仅为实验室发酵水平的70%。
宁南霉素水稻自叶帖病是水稻生产上的三大病害之一.化学农药虽然有控制该病的作用,但造成环境和农产品污染,直接影响人、畜健康,宁南霉素为首次发现的胞嘧啶核苷肽型新抗生素.它是一种高效,低毒,低残留的广谱性农用抗生索。它对水稻白叶枯病平均相对防治效果为70%左右.高的可达90%,一般增产效果为l0—20%,高的可达35%.另外它对小麦.蔬菜,花卉等白粉病的防病,增产效果都很显著,对水稻小球菌棱病和油橄榄孔雀斑瘸、疮痂病也有良好的防治效果。
宁南霉:玉米粉2%淀粉1%.花生饼粉3%,酵母粉0.05%,无机盐按原用量NaCl0.5%,CaCO30.5%,MgSO40.0025%,(NH4)2SO40.25%,K2HpO40.02%不变。
1.1-l菌种:诺尔斯链霉菌西昌变种。
1.1.2培养基:
孢子斜面培养基(%):可溶性淀粉2蔗糖1,硝酸钾1,磷酸氢二钾0.5,硫酸镁0.5,氯化钠0.5,碳酸钙0.5,硫酸亚铁0.01,琼脂2,灭菌前pH72~7.4。
种子培养基(%):玉米粉2,黄豆饼粉3,酵母粉0.01,磷酸氢二钾0.01,硫酸镁O.0025,氯化钠0.02,碳酸钙0.03,灭菌前pH7.0。
发酵培养基(%):玉米粉2,花生饼粉3.5,酵母粉0.05,磷酸氢二钾0.02,硫酸镁0.05,氯化钠0.3,碳酸钙0.5,灭菌前pH7.0。
1.1.3发酵流程:
续发酵48h达到发酵高峰。
阿维菌素:
多抗霉素参考发酵培养基(%);玉米粉:1.5,豆饼粉:2.0,饴糖:2.0,KH2p04:O.1,NaCl:0.1,CaC03:O.3,pH6.5。10%接种量,28℃,120h。
BT:一系列发酵罐间歇发酵结果表明:该茵生长的最适pH在7.0—7.2,弱碱性条件有利于芽泡及晶体的形成;增加培养基中糖含量显著提高茵体的生长量,但对芽泡及晶体的形成均有一定影响;高通气量有利于菌的生长,并可缩短发酵周期,但后期通气量过大影响芽泡及晶体形成。该菌制刑发酵罐间歇发酵的最佳工艺条件为:控制发酵温度在30℃,发酵前期(包括延迟期、加速期、对数期)pH控制在7.0,采用达1:2.0V/(V.min)的大通气量,达1:2.0V/(V·min),为菌的生长提供良好的环境,尽可能提高菌数(高于7.5x10的10次方/ml);发酵后期(减速期、恒定期)不控制pH,并适当减小通气旦到1:0.5,1:1.0V/(V·min),更有利于茵体向芽孢及伴孢晶体转化(98%以上)。
液体培养基(%)I号培养基:牛肉膏0.5,蛋白胨1.5,NaCl0.5,pH7.2,H号培养基:牛肉膏0.5,蛋白胨1.5,NaCl0.5,葡萄糖1.0,pH7.2
衣康酸发酵参考环境:5~100吨罐,搅拌转速100转/分,通风量1:0.2/分,罐压0.7公斤,pH在4左右,培养基主要成分为葡萄糖14%,米糠0.3%,各种无机盐适量,发酵菌种采用土曲霉,发酵周期90小时。

曲酸发酵参考环境:5~100吨罐,搅拌转速100转/分,通风量1:0.2/分,罐压0.7公斤,pH在4左右,培养基主要成分为液化淀粉14%,各种无机盐适量,发酵菌种采用黄曲霉,发酵周期130小时。
实验以豆腐渣、黄浆水为主要原料利用米曲霉发酵生产曲酸,对发酵生成曲酸所需添加的各种营养因素和发酵条件进行了研究。

得出该菌利用豆渣的最佳发酵培养基为:豆渣80%、麸皮24%、酵母膏1.2%、MgSO4·7H2O0.16%,pH为自然;接种量为10%,每250mL三角瓶装量为50g,在30℃发酵培养,5~6d菌体生长量和曲酸产量最大。米曲霉利用黄浆水生产曲酸的最佳发酵培养基为:葡萄糖12%、酵母膏0.5%、MgSO4·7H2O0.05%、K2HpO40.05%、黄浆水100%,pH为6.0,接种量10%。每250mL三角瓶装量100mL在30℃转速为200r/min的摇床振荡发酵培养,5~6d菌体生长量和曲酸产量最大。对米曲霉沪酿3.042曲酸发酵工艺条件进行了研究,分析了碳源、氮源、pH、装液量对曲酸产酸量的影响,获得了最优摇瓶培养条件:10%蔗糖、1%蛋白胨、pH=2.5、装液量40mL(250mL三角瓶),发酵温度30℃、摇瓶转速200r/min条件下达最高产酸量3340mg·L^-1。 从土壤中分离出一株曲酸产量较高的米曲霉(Aspergillusoryzan)菌株,对该菌株的发酵条件进行了初步研究。结果表明,该菌株在淀粉8%、酵母膏0.2%、MgSO4·7H2O0.05%、K2HpO40.1%、pH6.0的培养基中,28℃恒温摇床据荡培养6d,摇瓶发酵液曲酸含量为41.2mg/mL。 
F31012变株是以Aspergillusoryzae(米曲霉)2336经3次紫外诱变处理,采用快速筛选方法而获得的突变株,研究了F31012变株发酵工艺条件,经过正交试验得出该突变株最佳发酵培养基为:玉米淀粉10%,酵母膏0.2%,K2HpO40.15,MgSO4.7H2O0.05%,KCl0.05%,pH6.0.移种量为15%,每300ml三角瓶装量75ml,时间6天,发酵培养基最适温度为30℃。
柠檬酸发酵参考环境:5~100吨罐,搅拌转速100转/分,通风量1:1/分,罐压0.7公斤,
pH在3左右,培养基主要成分为液化淀粉14%,各种无机盐适量,发酵菌种采用黑曲霉,发酵
产酸温度为34~36℃,发酵周期90小时。

谷氨酸发酵参考环境:5~100吨罐,搅拌转速100转/分,通风量1:1/分,罐压0.7公斤,pH在7左右,培养基主要成分为葡萄糖13%,硫酸镁0.08%,磷酸二氢钾0.08%,糖蜜0.05%,氯化钾0.1%,发酵菌种采用谷氨酸棒杆菌,发酵周期30小时。

赖氨酸发酵参考环境:5~100吨罐,搅拌转速100转/分,通风量1:1/分,罐压0.7公斤,pH在7左右,培养基主要成分为葡萄糖14%,硫酸镁0.04%,硫酸铵2%,硫酸氢二钾0.1%,尿素0.4%,豆饼粉0.5%,发酵菌种采用谷氨酸棒杆菌,发酵周期35小时。
种子培养基:葡萄糖1.5g,(NH4)2SO40.4g,MgSO4·7H2O40mg,玉米浆2.0g,尿素0.1g,CaCO33.0g,乙酸铵0.1g,K2HpO4’3H200.15g,盐酸豆饼水解液0.86mL,水100mL,pH7.2~7.4,115℃高压灭菌15min。
发酵培养基:葡萄糖15.0g,(NH4)2SO43.5g,CaCO34.0g,MgSO4*7H2O20mg,玉米浆
2.5g,乙酸铵0.9g,生物素20ug,K2Hp04·3H2O0.15g,盐酸豆饼水解液1.6mL,水100mL,
pH7.2~7.4。115℃高压灭菌15min。
赤藓糖醇:在20%葡萄糖,O.5%酵母膏,pH6.0的发酵培养液中,于34℃发酵摇瓶6天,可产赤藓糖醇32mg/ml。
推荐产品:DF6000K。
在分批培养中,葡萄糖的开始浓度3O0g/L,赤藓糖醇的容量生产率最高=葡萄糖的浓度控制在225g/L,容量生产率最高,赤藓糖醇的生。迟缓时间缩短。补料分批培养的葡萄糖开始浓度是300g/L.控制的葡萄糖浓度是225g/L,,磷源是肌醇六磷酸(植酸)一在这样的补料分批培养中,400g/L葡萄糖,88小时的赤藓糖醇最后产量为192g/L,相当于容量生产率226g/L/h,产率48%

醇酮类物质

发酵参考环境:5~100吨罐,搅拌转速115转/分,罐压0.5公斤,最高通风量1:1/分,pH在6左右,发酵培养基主要成分为液化淀粉,发酵菌种采用芽孢杆菌,发酵时间80小时左右。

碱性蛋白酶发酵菌种为芽孢杆菌(Bacillus),37℃,培养48h,
1发酵培养基l:可溶性淀粉1%、蛋白胨0.5%、Na2HpO4*12H2O0.4%、KH2p040.03%、CaCl20.1%、pH中性、121℃灭菌25rnin。
2发酵培养基Il:玉米粉2%、豆饼粉3%、麸皮3%、Na2HpO4*12H2O0.4%、KH2p040.03%、ZnCl20.1%、pH8.0、121℃灭菌25min。
发酵培养基(1000mL):黄豆饼粉50g,玉米粉50g,麸皮25g,KH2pO40.3g,Na2HpO40.4g,Na2CO3lg;自然pH,在36℃下通风培养,前期通风1:0.15,后期通风1:0.2,搅拌40h左右。
低温碱性蛋白酶:黄海黄杆菌
发酵培养基
(1)豆饼粉(水解液,加0.5%NaOH,121℃水解30min,冷却、过滤)4.5%、玉米浆(酶解液.购自华北制药厂)6%、Na2HpO40.4%、KH2pO40.03%、Na2CO,0.1%、MgSO40.02%、CaC120,2%、泡敌约0.5‰(视具体情况及时补加),pH7,121℃灭菌30min。
(2)豆饼粉(水解液.加0.5NaOH,121℃水解30min,冷却、过滤)4.5%、葡萄糖1%、Na2HpO40.4%、
KH2pO40.03%、Na2CO30.1%、MgSO40.02%、CaC120.2%、泡敌约0.5‰(视具体情况及时补加),pH7。121℃灭菌30min
分批发酵动力学试验
使用瑞士Bioengineering公司NLF22型自动控制发酵罐进行分批发酵。发酵罐容积20L.两层六平直叶搅拌,双挡板。采用1.2.3节(1)培养基,装料系数0.65,接种量4%,培养温度18℃,以5mol/LNaOH液调节pH7左右,通气量1:1、搅拌速度300~500r/min,控制溶氧在35%~45%之间。
补料分批发酵试验
使用瑞士Bioengineerig公司NLF22型自动控制发酵罐进行补料分批发酵。发酵罐容积2OL,两层六平直叶搅拌,双挡板。采用1.2.3节(2)培养基,装料系数0.4,接种量4%,培养温度18℃,以5mol/LNaOH液调节pH7左右,通气量1:1、搅拌速度300~500r/min,控制溶氧在35~45之间。当细胞进入对数生长期后以60%葡萄糖补料,控制底物浓度并及时取样测定糖浓度、细胞浓度及总酶活力。
弹性蛋白酶发酵培养基酪蛋白胨3%,葡萄糖4%,玉米提取液0.2%,K2HpO40.1%,MgSO*7H2O0.01%,pH7.0.发酵菌种为芽孢杆菌,发酵培养24h.
对黑曲霉黄色变株A一2580产耐温酸性蛋白酶的发酵条件进行优化,由试验结果得如下结论:
(1)麸皮和豆饼粉分别是该菌发酵产生酸性蛋白酶的良好碳源和氮源.(2)通过正交试验优化培养基,确定其最适产酶培养基为(g/L):麸皮21.6、豆饼粉48.4、NHC12.0、KH2pO0.8.(3)培养基起始pH为4~5,接种量30ml发酵液中2×108次方个孢子,发酵温度30℃,时间72h,酸性蛋白酶的产量达到最高,平均酶活达6700u/m1.

中性蛋白酶:
菌种耐热芽孢杆菌XJT9503,从新疆吐鲁番火焰山土壤里分离筛选而得.
种子培养基组分(g/dI):玉米粉2,豆饼粉1,磷酸氢二钠0.4,硫酸镁0.02,氯化钙0.02.
发酵培养基组分(g/dI):玉米粉2,豆饼粉1,葡萄糖0.5,磷酸氢二钠0.4,碳酸钠0.085,硫酸镁0.02,氯化钙0.02.
3000L发酵罐发酵工艺参数为:将培养8h的种子罐种子,以5%接种量移种于3000L发酵罐,46℃、180r/min、4L/(L·min)通气量下发

酵培养18h左右,测定发酵酶活达10000u/mI以上,还原糖含量低于0.5%,镜检有大量芽孢产生时即可终止发酵,为保证后处理过程中酶活不会大量损失,需迅速降温.
植酸酶发酵参考环境:5~100吨罐,搅拌转速115转/分,罐压0.5公斤,最高通风量1:1/分,pH在7左右,发酵培养基主要成分为甘油和氨水,发酵菌种采用毕赤酵母,发酵时间140小时左右。
推荐产品:DF204K。
碱性淀粉酶发酵培养基(%):酵母膏0.5、玉米淀粉2.0、玉米浆1.5、豆饼粉1.0、NaC10.5、K2HpO40.1、MgSO4*7H2O0.02,pHl0,补料培养基(g):蛋白胨1.0、玉米淀粉1.5、玉米浆1.5、NaC10.5,K2HpO40.1、MgSO4*7H200.02、CaCO30.5、pH10。
地衣芽孢杆菌ATCC9789耐高温a淀粉酶的发酵培养基(%),玉米淀粉,豆粕,磷酸盐,氯化钙等,发酵周期60小时。
普通中温淀粉酶菌种a一淀粉酶枯草芽孢杆菌BF-7658变异株具有较高的产活力,其最适pH为7.5,最适碳氮比为1.4:1。a-淀粉酶发酵培养基:玉米粉7%,豆饼粉5%,磷酸氢二钠O.8%,硫酸铵O.4%,氯化钠O.15%,灭菌前pH7.O一7.5,灭菌后pH6.5—7.0。37.4±1℃下培养44~48小时。
纤维素酶发酵培养基为:(NH4)2HpO40.2%、K2HpO40.02%,KH2pO40.08%、酵母膏1.0g、MgSO4*
7H2O0.09%、蛋白胨0.2%、pH自然,
纤维素酶种子培养基(质量分数,%):麸皮2,葡萄糖3,(NH4)2SO40.15,pH5.5~6.0,28~30℃,培养40h;发酵培养基(质量分数,%):稻草粉6,豆饼粉1,KH2pO40.5,CaC120.3,pH5.5~6.0。28~30℃,培养140h。发酵菌种采用黑曲霉(Aspergillusniger)GD6。
糖化酶发酵培养基:玉米粉l4%,豆饼粉4%,麸皮1%。发酵菌种采用黑曲霉AS-4309,32℃培养120h,淀粉先用耐热细菌a-淀粉酶液化。

黄原胶发酵参考环境:5~100吨罐,搅拌转速115转/分,罐压0.5公斤,最高通风量1:0.5/分,pH在7左右,发酵培养基主要成分葡萄糖4%,酵母粉0.05%,豆粕粉0.02%,无机盐适量,发酵菌种采用黄单孢菌,28℃,发酵周期72h,发酵液最高粘度14600mpas左右。
虫草多糖:发酵参考环境:5~100吨罐,搅拌转速140转/分,通风量1:0.5/分,罐压0.5公斤。发酵培养基中葡萄糖4.0%,黄豆饼粉4.0%,酵母膏0.5%,KH2pO40.25%,MgSO4O.15%,培养45~72小时。

纤维素合成的发酵配方:
AxylinumNUST4的细菌发酵培养基:葡萄糖24g/L,蔗糖22g/L,蛋白胨16g/L,醋酸2.4mL/L,磷酸氢二钠3.5g/L,磷酸二氢钾1g/L,硫酸镁0.25g/L。Mg2+最适添加量为6g/L;0.015g/LFe2+时纤维素产量达最大;添加0.003g/L烟酸、0.02g/L生物素和20mL/L乙醇时纤维素产量达9.87g/L
木醋杆菌1.1812发酵产细菌纤维素的适宜培养基和条件是:蔗糖5%,蛋白胨1.5%,柠檬酸0.2%,Na2HPO4·12H2O0.2%,KH2PO40.2%,MgSO4·7H2O0.03%,乙醇1%,pH值6.8,温度28℃,培养周期6d。细菌纤维素产量干重为2g/L。发酵完毕后过滤收集粗纤维,再用4%NaOH溶液冲洗,去离子水和0.5%乙酸反复冲洗,即获细菌纤维素。
木醋杆菌Acetobacterxylinum1000mL种子培养基中葡萄糖4%(40g),玉米浆55mL,Na2HpO40.5%(5g),生物素25mg,咖啡因2mg,柠檬酸1g,pH6.0。将菌龄为24h的液体种子,按8%的接种量,在100r/min摇床中培养Id后静止培养6d,纤维素产量高达7.22g/L,是国内外报道的未进行诱变育种产纤维素的最高值。发酵培养基生物素25mg/L,咖啡因2mg/L,柠檬酸0.1%,其余同种子培养基。
醋杆菌C2的最适碳源为D-甘露糖醇和蔗糖,最适氮源为酵母粉

,蛋白胨,无机盐为MgSO4·7H20和柠檬酸三钠;该菌株产酶最佳培养基配方为:蔗糖7%,酵母膏0.7%,蛋白胨1.1%,MgSO4·7H2O 0.2%,柠檬酸三钠0.1%。使用该培养基配方发酵醋杆菌C2,纤维素产量可达9.5g/L。



 
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